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JC-1(綫(xiàn)粒體膜(mó)電位(wèi)探(tàn)針)的(dí)描(miáo)述

2024-05-26 [2775]

檢(jiǎn)測原(yuán)理

JC-1的(dí)工作(zuò)原(yuán)理基於其在不(bù)同綫粒體(tǐ)膜電位(wèi)狀(zhuàng)態下的熒光(guāng)特性(xìng)變(biàn)化。在高綫粒(lì)體膜(mó)電位(wèi)的情況(kuàng)下,JC-1以聚(jù)合(hé)物的形式(shì)存在,發出(chū)紅(hóng)色熒光(guāng);而在(zài)低(dī)綫(xiàn)粒(lì)體(tǐ)膜(mó)電(diàn)位的(dí)情(qíng)況下,JC-1以單(dān)體的形式(shì)存在,發出(chū)綠色(sè)熒光(guāng)。通(tōng)過監(jiān)測(cè)紅綠(lǜ)熒(yíng)光(guāng)的(dí)比(bǐ)例變化(huà),可以評(píng)估(gū)綫(xiàn)粒體的狀態(tài),從而(ér)判斷細(xì)胞的(dí)健康(kāng)程(chéng)度或是(shì)否處於凋(diāo)亡過程中(zhōng)。

結構(gòu)式(shì):

image.png

概述(shù)

JC-1是一種常用的熒(yíng)光探針(zhēn),用於(yú)測量(liáng)綫粒體(tǐ)膜電位。它能(néng)夠(gòu)選擇性地進入(rù)綫(xiàn)粒體,並且(qiě)隨著(zhuó)綫粒體膜(mó)電位的(dí)增加(jiā),可以(yǐ)逆地(dì)將(jiāng)其顏色從綠色(sè)變為橙色。這種(zhǒng)性質使得JC-1成為(wéi)研(yán)究細胞凋(diāo)亡(wáng)時的理想(xiǎng)工(gōng)具,因為綫粒(lì)體膜電位(wèi)的(dí)下(xià)降是細胞凋(diāo)亡早期(qī)的(dí)一(yī)個標誌(zhì)性事件。

染色(sè)步驟

使(shǐ)用(yòng)JC-1進(jìn)行綫(xiàn)粒(lì)體(tǐ)膜電位檢(jiǎn)測的步驟通常包(bāo)括細(xì)胞準(zhǔn)備(bèi), JC-1染(rǎn)色(sè),洗滌(dí)和熒(yíng)光檢(jiǎn)測等幾個(gè)環節。具體的步驟可能會(huì)根據實(shí)驗條件和(hé)設備的不同而有(yǒu)所差異,但(dàn)基(jī)本流程(chéng)通(tōng)常(cháng)是(shì):

細(xì)胞準備:將細(xì)胞(bāo)鋪(pū)板在(zài)多孔培養(yǎng)板(bǎn)上,然(rán)後在適(shì)宜(yí)的(dí)條件下(xià)培養(yǎng)過夜(yè)。

JC-1染色(sè):取(qǔ)一定體(tǐ)積(jī)的細胞(bāo)懸(xuán)液,加(jiā)入(rù) JC-1工作液(yè),在適宜的溫(wēn)度(dù)和(hé)二氧(yǎng)化(huà)碳環(huán)境(jìng)下(xià)孵育一段時間(jiān)。

洗滌:離(lí)心細胞懸液,去除上清,然後(hòu)用(yòng)緩(huǎn)衝液洗(xǐ)滌以去(qù)除未(wèi)結(jié)合(hé)的染料。

熒(yíng)光檢(jiǎn)測:用熒光顯微鏡或流式(shì)細胞儀分析經JC-1染色後的(dí)細胞(bāo),通過(guò)觀察紅綠熒光的比(bǐ)例(lì)變化(huà)來(lái)判斷綫(xiàn)粒體膜(mó)電(diàn)位的狀態(tài)。

注意事項(xiàng)

JC-1必(bì)須在超(chāo)純水(shuǐ)充(chōng)分(fēn)溶(róng)解混(hùn)匀後才能加(jiā)入到(dào)JC-1染色緩衝液中(zhōng),否則(zé)會(huì)影響(xiǎng)後續的檢測。

PH的(dí)變化會(huì)影響(xiǎng)膜(mó)電位(wèi),因此在(zài)染色(sè)過程(chéng)中(zhōng)需(xū)要(yào)保持(chí)染液(yè)中pH的(dí)一(yī)致(zhì)性。

JC-1不(bù)易(yì)溶(róng)於水(shuǐ)並有大量(liáng)沉澱產(chǎn)生,因此在(zài)操(cāo)作時需要(yào)特(tè)別(bié)注意。

關(guān)於我(wǒ)們(mén):

陝西星(xīng)貝愛科生(shēng)物(wù)科技經營的(dí)產(chǎn)品種(zhǒng)類包(bāo)括(kuò)有:合成磷(lín)脂(zhī),高(gāo)分子聚乙二醇衍生物,嵌段(duàn)共(gòng)聚(jù)物,磁性納米(mǐ)顆(kē)粒(lì),納(nà)米金(jīn)及納(nà)米金棒(bàng),近紅(hóng)外熒(yíng)光染料(liào),活(huó)性(xìng)熒光(guāng)染料,熒(yíng)光標(biāo)記(jì)物(wù),蛋(dàn)白(bái)交聯劑,小(xiǎo)分(fēn)子PEG衍生物(wù),點(diǎn)擊化學產(chǎn)品,樹(shù)枝(zhī)狀聚(jù)合(hé)物,環糊(hū)精衍生物(wù),大環(huán)配體(tǐ)類,熒(yíng)光量子點,透明質酸衍(yǎn)生物,石墨(mò)烯或氧化(huà)石(shí)墨(mò)烯(xī),碳納(nà)米管(guǎn),富勒烯,二(èr)氧(yǎng)化矽及(jí)介(jiè)孔二氧化(huà)矽,聚合物(wù)微球,近(jìn)紅外(wài)熒(yíng)光(guāng)染料(liào),聚(jù)苯乙烯微球,上(shàng)轉換納(nà)米發(fā)光(guāng)顆粒,MRI核磁(cí)造(zào)影(yǐng)產(chǎn)品,熒光(guāng)蛋白及熒(yíng)光(guāng)探(tàn)針等等。

溫馨提示:供(gōng)應產(chǎn)品(pǐn)僅用(yòng)於科研,不(bù)能用(yòng)於(yú)人(rén)體(tǐ)!

相關(guān)產(chǎn)品(pǐn):

AFDye 532 DBCO     

AFDye 546 DBCO    

AFDye 555 DBCO     

AFDye 568 DBCO      

AFDye 594 DBCO 

AFDye 647 DBCO    

Alexa Fluor 647 DBCO

AFDye 532 DBCO     

AFDye 546 DBCO    

AFDye 555 DBCO