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首頁 > 新聞資訊 > 如(rú)何使(shǐ)用 PC Biotin-PEG3-NHS carbonate ester 進行蛋白(bái)質標(biāo)記?

如何使用(yòng) PC Biotin-PEG3-NHS carbonate ester 進(jìn)行(háng)蛋(dàn)白質標(biāo)記(jì)?

2024-07-30 [248]

名稱(chēng)

中文名稱(chēng)PC生物(wù)素(sù)-PEG3-NHS酯(zhǐ)

英(yīng)文(wén)名(míng)稱PCbiotin-PEG3-NHSester

化合(hé)物(wù)性質

CAS2353409-93-3

分子式C36H52N6O15S

分子(zǐ)量(liáng)840.89

外觀:黃色(sè)實(shí)心

檢(jiǎn)測(cè)圖譜:1H NMR

儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn):-20

結構式(shì):

如(rú)何使用(yòng) PC Biotin-PEG3-NHS carbonate ester 進(jìn)行(háng)蛋白(bái)質(zhì)標記?

結(jié)構和性質

PC Biotin-PEG3-NHS carbonate ester 是(shì)一(yī)種(zhǒng)功(gōng)能化(huà)的生(shēng)物素衍生物(wù),它結合了(liǎo)生物(wù)素,聚(jù)乙(yǐ)二醇(PEG)鏈(liàn)和NHSN-hydroxysuccinimide)碳酸酯酯(zhǐ)基團(tuán)。這(zhè)種特別的結構(gòu)使得它(tā)在(zài)生物(wù)分子標記(jì)和化學修(xiū)飾中具有廣(guǎng)泛的(dí)應(yīng)用(yòng)潛(qián)力。此外(wài),它還具(jù)有光(guāng)可(kě)切(qiē)割特性(xìng),允(yǔn)許在(zài)沒有試劑(jì)的情(qíng)況(kuàng)下(xià)從streptavidin微(wēi)球上釋放(fàng)捕獲的生物分子(zǐ)。

使(shǐ)用 PC Biotin-PEG3-NHS carbonate ester 進行(háng)蛋(dàn)白質標記的一(yī)般步驟如(rú)下(xià):

 

準(zhǔn)備(bèi)蛋白(bái)質溶液(yè)將(jiāng)待(dài)標(biāo)記的蛋白(bái)質溶解在適當(dāng)的緩衝液中(zhōng),確(què)保蛋白質的穩定性和(hé)溶解(jiě)性(xìng)。

計(jì)算(suàn)試劑(jì)用量:根(gēn)據(jù)蛋(dàn)白質(zhì)的濃(nóng)度和(hé)需要的(dí)標記(jì)程(chéng)度,確定 PC Biotin-PEG3-NHS carbonate ester 的使用量。通常需要(yào)進(jìn)行(háng)一(yī)些預實驗(yàn)來(lái)優化試劑比(bǐ)例。

反應(yīng):在適當的(dí)條(tiáo)件下,將(jiāng) PC Biotin-PEG3-NHS carbonate ester 加入到(dào)蛋(dàn)白質溶(róng)液(yè)中。該(gāi)試(shì)劑(jì)的(dí) NHS 部(bù)分(fēn)會(huì)與蛋白(bái)質上(shàng)的伯(bó)胺基團特(tè)異性反(fǎn)應(yīng),形成氨基甲酸(suān)酯鍵(jiàn),從(cóng)而(ér)實現(xiàn)標記(jì)。反應條件可(kě)能(néng)會因具體實驗(yàn)要求而(ér)有所不同(tóng),一(yī)般在(zài)室溫或(huò)稍(shāo)高的溫度下(xià)進行一定(dìng)時間的孵(fū)育(yù)。

控(kòng)製反應時(shí)間:反應時間(jiān)需(xū)要(yào)根據實際(jì)情況進行優化,以(yǐ)確保充分標記,同時(shí)避免(miǎn)過度反(fǎn)應(yīng)導致(zhì)蛋(dàn)白質變(biàn)性(xìng)或其他不(bù)良影(yǐng)響。

終(zhōng)止反(fǎn)應(可選):根(gēn)據需要,可以通(tōng)過加入適當的淬滅(miè)劑(jì)或進(jìn)行透(tòu)析(xī)等(děng)方法來(lái)終止(zhǐ)反應。

純化:標記後的蛋白質可(kě)能(néng)需要進(jìn)行純(chún)化(huà),以去(qù)除(chú)未(wèi)反應的試劑和其他雜質(zhì)。可(kě)以使用(yòng)凝(níng)膠過濾(lǜ),透析或其他(tā)合適(shì)的(dí)純化(huà)方法(fǎ)。

 

在(zài)整個過程(chéng)中(zhōng),需(xū)要(yào)注意以(yǐ)下(xià)幾(jī)點(diǎn):

 

試劑的保存:PC Biotin-PEG3-NHS carbonate ester 對光(guāng)和溫度(dù)敏(mǐn)感,應始(shǐ)終保持在低(dī)溫(wēn)幹燥(zào),避光的條件(jiàn)下。

緩衝液的(dí)選擇:使用適合(hé)蛋白(bái)質穩定(dìng)和(hé)反(fǎn)應(yīng)進行(háng)的(dí)緩衝(chōng)液。

優化條(tiáo)件:通過預(yù)實驗優化試劑用(yòng)量,反(fǎn)應時(shí)間和溫度等條件(jiàn),以獲得最(zuì)佳的標(biāo)記(jì)效(xiào)果。

蛋白(bái)質(zhì)的質(zhì)量(liáng)和純度:較高(gāo)質量和(hé)純(chún)度(dù)的蛋白(bái)質有(yǒu)助於提(tí)高標記的效率和(hé)準確(què)性。

關於(yú)我(wǒ)們(mén):

陝西星貝(bèi)愛科生物(wù)科技經(jīng)營的產品(pǐn)種類包(bāo)括(kuò)有(yǒu):合成磷(lín)脂,高分(fēn)子聚乙(yǐ)二醇衍(yǎn)生(shēng)物,嵌(qiàn)段共聚(jù)物,磁性納米(mǐ)顆(kē)粒(lì),納(nà)米金及納米金棒(bàng),近紅外熒(yíng)光染(rǎn)料,活性熒光染料,熒(yíng)光標記(jì)物(wù),蛋白(bái)交聯劑,小分子PEG衍生物,點(diǎn)擊(jī)化(huà)學(xué)產(chǎn)品,樹枝狀聚合物(wù),環(huán)糊精衍生物,大環(huán)配體類,熒光量(liáng)子點(diǎn),透明質酸(suān)衍(yǎn)生物,石(shí)墨烯或氧(yǎng)化(huà)石(shí)墨烯,碳(tàn)納米(mǐ)管,富勒烯(xī),二氧化矽及(jí)介(jiè)孔二氧化矽,聚合物(wù)微(wēi)球(qiú),近紅外熒光染(rǎn)料,聚苯乙(yǐ)烯(xī)微球,上(shàng)轉(zhuǎn)換納米發光顆(kē)粒(lì),MRI核磁造(zào)影產(chǎn)品(pǐn),熒光(guāng)蛋白(bái)及熒光探針等等。

溫馨(xīn)提示(shì):供(gōng)應(yīng)產品僅(jǐn)用(yòng)於科研,不能(néng)用於人(rén)體(tǐ)!

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