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首(shǒu)頁(yè) > 新(xīn)聞資(zī)訊(xùn) > 生物素(sù)-C5-馬來(lái)酰(xiān)亞胺(àn)標記蛋(dàn)白的具體(tǐ)步驟是(shì)什麼(mó)?

生(shēng)物素(sù)-C5-馬來(lái)酰亞胺標(biāo)記蛋白的具(jù)體步(bù)驟是什麼?

2024-08-04 [275]

生(shēng)物(wù)素(sù)-馬來酰胺和生物素-二硫吡啶(dìng)等(děng),用於(yú)在巰(qiú)基(jī)上特異性(xìng)地標記生(shēng)物素(sù)抗體(tǐ)和(hé)其他(tā)生物(wù)分子(zǐ)。

基本(běn)信息(xī)

中文名稱:生(shēng)物素-C5-馬來酰(xiān)亞胺

英文名稱:Biotin-C5-Mal

檢測(cè)圖譜(pǔ):1小時核磁共振

外觀:淺黃色或白(bái)色固體

分子(zǐ)式:C14H19N3O3S

分(fēn)子量(liáng):309.38

儲存條件(jiàn):-20

狀態:固體/粉(fěn)末

結(jié)構式:

生物素-C5-馬(mǎ)來(lái)酰亞(yà)胺(àn)標(biāo)記(jì)蛋白(bái)的(dí)具(jù)體步(bù)驟(zhòu)是什(shí)麼?

以下是使(shǐ)用生(shēng)物素(sù)-C5-馬(mǎ)來酰(xiān)亞胺(àn)標記(jì)蛋白的一般步驟:


準備工(gōng)作(zuò):


  1. 確(què)保(bǎo)實驗(yàn)環境清(qīng)潔(jié),準備所(suǒ)需(xū)的試(shì)劑和器(qì)材(cái),如生物(wù)素(sù)-C5-馬(mǎ)來(lái)酰亞胺(àn),待標記的蛋白質(zhì)溶液,適(shì)當的(dí)緩衝(chōng)液(如磷酸鹽(yán)緩(huǎn)衝液(yè) PBS),透析袋或(huò)脫鹽柱等。


標(biāo)記反應:


  1. 將待標記(jì)的(dí)蛋(dàn)白(bái)質溶解在(zài)合(hé)適的緩衝液中,調(tiáo)整蛋白質濃度(dù)至(zhì)適當(dāng)範(fàn)圍。

  2. 按(àn)照(zhào)一定的(dí)比例(通常(cháng)根(gēn)據蛋白質的(dí)濃(nóng)度(dù)和生物(wù)素-C5-馬來酰亞胺的活(huó)性來確定),將生物(wù)素(sù)-C5-馬來酰(xiān)亞(yà)胺(àn)加入到蛋白質(zhì)溶液中(zhōng)。

  3. 在適當的(dí)溫(wēn)度(dù)(例如室(shì)溫或 4°C)下,緩慢(màn)攪拌或輕輕振(zhèn)蕩反(fǎn)應(yīng)混合(hé)物,使標(biāo)記反(fǎn)應進行一定的時間(反應時間可(kě)能因實驗(yàn)條件和蛋白質(zhì)的(dí)特性(xìng)而異(yì),通(tōng)常為(wéi)數(shù)小(xiǎo)時)。


去除(chú)未反(fǎn)應的(dí)試劑:


  1. 可(kě)以(yǐ)使用(yòng)透(tòu)析袋在適當(dāng)的(dí)緩衝液中進行透析,以去(qù)除(chú)未反應(yīng)的生(shēng)物(wù)素-C5-馬(mǎ)來酰(xiān)亞胺和(hé)其他小分子雜質(zhì)。

  2. 或者(zhě)使用脫(tuō)鹽柱來分(fēn)離蛋(dàn)白質(zhì)和未反應的試(shì)劑。


檢測和(hé)驗證標記(jì)效(xiào)果:


  1. 可以通(tōng)過一(yī)些方(fāng)法來(lái)檢(jiǎn)測標記是否(fǒu)成功(gōng),如(rú)使(shǐ)用生物(wù)素檢測試劑(jì)盒,熒(yíng)光檢(jiǎn)測(cè)(如果生物素(sù)-C5-馬(mǎ)來(lái)酰(xiān)亞(yà)胺帶有熒(yíng)光基團)等(děng)。


需要注意的是,具體(tǐ)的實驗步驟(zhòu)可能(néng)需(xū)要(yào)根據您所(suǒ)使用的(dí)蛋(dàn)白質的性(xìng)質,實驗目的以及(jí)實驗(yàn)條(tiáo)件進行(háng)適當的(dí)優化(huà)和調整(zhěng)。例(lì)如,對(duì)於某(mǒu)些(xiē)容(róng)易(yì)失活(huó)的蛋白(bái)質,可能需(xū)要在低溫和(hé)更(gēng)溫(wēn)和(hé)的(dí)條件(jiàn)下(xià)進(jìn)行(háng)標記反應。

關於我(wǒ)們(mén):

陝西(xī)星(xīng)貝愛(ài)科(kē)生物(wù)科技(jì)經(jīng)營的(dí)產(chǎn)品(pǐn)種類包括有:合成磷脂,高(gāo)分子聚乙二醇(chún)衍生物(wù),嵌(qiàn)段共聚(jù)物(wù),磁(cí)性(xìng)納(nà)米(mǐ)顆粒(lì),納米(mǐ)金及納米金棒(bàng),近紅外熒光染(rǎn)料(liào),活性熒光(guāng)染料(liào),熒光標記物,蛋白交(jiāo)聯劑,小分子PEG衍生物,點擊化學(xué)產品(pǐn),樹枝狀(zhuàng)聚(jù)合(hé)物,環糊(hū)精(jīng)衍生(shēng)物,大環配(pèi)體(tǐ)類,熒光量子(zǐ)點,透明質(zhì)酸(suān)衍生物(wù),石墨烯(xī)或(huò)氧化(huà)石墨烯,碳納(nà)米管,富(fù)勒烯(xī),二氧(yǎng)化矽(guī)及介孔(kǒng)二氧(yǎng)化矽,聚(jù)合(hé)物微球,近(jìn)紅(hóng)外(wài)熒光(guāng)染料,聚(jù)苯乙烯微球(qiú),上(shàng)轉(zhuǎn)換(huàn)納(nà)米發光顆粒(lì),MRI核(hé)磁(cí)造影產(chǎn)品,熒光(guāng)蛋白(bái)及(jí)熒光(guāng)探針(zhēn)等(děng)等(děng)。

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