可(kě)以用哪些(xiē)方法(fǎ)檢(jiǎn)測(cè)氫化(huà)可的鬆-牛血清白蛋白偶(ǒu)聯(lián)物?
2024-09-11
[206]
氫(qīng)化(huà)可的鬆-牛(niú)血清(qīng)白(bái)蛋白偶(ǒu)聯物|Hydrocortisone-Bovine Serum Albumin Conjugate(Hydrocortisone-BSA Conjugate)
可(kě)以用以(yǐ)下(xià)方(fāng)法(fǎ)檢測氫化可的鬆 - 牛(niú)血清白蛋(dàn)白(bái)偶聯物(wù):
一,紫(zǐ)外 - 可見分(fēn)光(guāng)光度(dù)法
原理:利用(yòng)氫(qīng)化可的(dí)鬆和牛血清(qīng)白(bái)蛋白(bái)在(zài)不同波長下(xià)的吸(xī)光特(tè)性差異。氫化可(kě)的鬆(sōng)在(zài)特(tè)定(dìng)波長處(chǔ)有吸收(shōu)峰,牛血清(qīng)白蛋白也(yě)有其(qí)特(tè)征(zhēng)吸(xī)收(shōu)區(qū)域。通過(guò)測量偶聯(lián)物在不(bù)同波長下(xià)的吸(xī)光(guāng)度,並與單獨的(dí)氫(qīng)化可的鬆(sōng)和牛血(xiě)清白(bái)蛋白的(dí)吸光度(dù)進行比(bǐ)較,可以初步(bù)判斷(duàn)偶聯物的(dí)存(cún)在及濃(nóng)度(dù)。
步驟:
測(cè)定單獨(dú)的氫化(huà)可的鬆和牛血(xiě)清(qīng)白蛋(dàn)白在特(tè)定波(bō)長下的(dí)吸光度(dù)標準曲綫(xiàn)。
測量氫化可(kě)的鬆(sōng) - 牛血(xiě)清白(bái)蛋(dàn)白偶聯(lián)物在(zài)相同波(bō)長下的(dí)吸(xī)光(guāng)度(dù)。
根(gēn)據(jù)吸光(guāng)度(dù)值和標(biāo)準曲(qū)綫(xiàn),估(gū)算(suàn)偶聯(lián)物的(dí)濃(nóng)度(dù)。
二,免(miǎn)疫分析(xī)法(fǎ)
酶聯(lián)免(miǎn)疫吸(xī)附(fù)測定(ELISA):
原理(lǐ):利用(yòng)抗(kàng)體與抗原(yuán)的特(tè)異(yì)性(xìng)結合。將(jiāng)抗氫化(huà)可(kě)的鬆抗(kàng)體或(huò)抗(kàng)牛血(xiě)清白蛋(dàn)白抗體(tǐ)包被在酶(méi)標板(bǎn)上,加入待(dài)測(cè)的(dí)氫化(huà)可的鬆(sōng) - 牛血清(qīng)白(bái)蛋白偶聯物(wù),偶(ǒu)聯物與抗體(tǐ)結(jié)合後,再加入酶標記的(dí)二抗,通過(guò)酶(méi)催(cuī)化(huà)底(dǐ)物顯(xiǎn)色(sè),根(gēn)據顯色(sè)強(qiáng)度(dù)來(lái)確定(dìng)偶聯(lián)物的濃(nóng)度。
步(bù)驟:包被抗體(tǐ),加入偶(ǒu)聯物,加入(rù)酶標二(èr)抗(kàng),顯色(sè)反應(yīng),測定(dìng)吸(xī)光度(dù)。
免(miǎn)疫(yì)印(yìn)跡法(Western blot):
原理(lǐ):通過電泳(yǒng)將偶聯(lián)物(wù)分(fēn)離,然後轉(zhuǎn)印到膜上,利用(yòng)抗體檢測偶(ǒu)聯物的(dí)存(cún)在。可(kě)以(yǐ)使(shǐ)用抗氫(qīng)化可的鬆(sōng)抗體或(huò)抗(kàng)牛(niú)血(xiě)清(qīng)白(bái)蛋(dàn)白抗體進行檢測。
步驟:電泳分離(lí),轉印,封閉(bì),一抗孵(fū)育(yù),二(èr)抗(kàng)孵育(yù),顯色。
三,凝(níng)膠過(guò)濾色(sè)譜法
原(yuán)理:根據分(fēn)子大小的差異進行分離。氫(qīng)化(huà)可的(dí)鬆(sōng) - 牛血(xiě)清(qīng)白(bái)蛋白(bái)偶聯(lián)物的(dí)分(fēn)子(zǐ)量與單(dān)獨(dú)的氫化(huà)可的鬆(sōng)和牛(niú)血清白(bái)蛋白(bái)不(bù)同(tóng),通過凝膠過濾(lǜ)色譜柱(zhù)可以(yǐ)將(jiāng)偶聯物(wù)與未偶(ǒu)聯(lián)的物(wù)質(zhì)分離(lí),從(cóng)而(ér)檢測偶(ǒu)聯物的存在。
步(bù)驟(zhòu):將待測(cè)樣(yàng)品(pǐn)上樣到凝膠過濾(lǜ)色譜柱中(zhōng),用(yòng)適(shì)當的緩(huǎn)衝(chōng)液進(jìn)行洗脫,收集不(bù)同(tóng)洗脫體(tǐ)積(jī)的餾分,通過(guò)檢測各(gè)餾(liù)分中(zhōng)的物質來確定偶聯物的存(cún)在和純度(dù)。
四,質譜(pǔ)分析法
原理:通過(guò)測定偶聯(lián)物的分(fēn)子(zǐ)量來確(què)定(dìng)其存(cún)在(zài)。質譜(pǔ)儀可(kě)以準確測量物(wù)質的分(fēn)子量,對於氫化可(kě)的(dí)鬆 - 牛血清白蛋白偶(ǒu)聯物(wù),可(kě)以(yǐ)根據其(qí)分(fēn)子量(liáng)與單獨的氫(qīng)化可的(dí)鬆(sōng)和(hé)牛血清白蛋白的差異來(lái)進行(háng)檢測。
步驟:將待(dài)測(cè)樣品(pǐn)進行質(zhì)譜(pǔ)分析,獲得其分(fēn)子量信(xìn)息,與理論分子(zǐ)量(liáng)進(jìn)行比較,確定(dìng)偶聯物的(dí)存在(zài)。
關於我們(mén):
陝(shǎn)西(xī)星(xīng)貝愛科(kē)生物科技經營的(dí)產品種類包括有:合成(chéng)磷(lín)脂,高(gāo)分(fēn)子聚乙(yǐ)二醇衍生物(wù),嵌(qiàn)段共(gòng)聚(jù)物(wù),磁(cí)性納(nà)米顆粒,納米金及(jí)納(nà)米(mǐ)金棒,近紅(hóng)外熒光(guāng)染料,活(huó)性熒光染料(liào),熒(yíng)光標記物,蛋(dàn)白交(jiāo)聯(lián)劑(jì),小分子PEG衍生(shēng)物,點(diǎn)擊化學產品(pǐn),樹枝狀(zhuàng)聚(jù)合物(wù),環糊精(jīng)衍(yǎn)生(shēng)物,大(dà)環配體(tǐ)類,熒光量(liáng)子點(diǎn),透明質酸衍(yǎn)生(shēng)物,石墨烯或(huò)氧化石(shí)墨烯,碳納米管(guǎn),富(fù)勒烯(xī),二(èr)氧(yǎng)化矽及介(jiè)孔(kǒng)二(èr)氧化(huà)矽(guī),聚合物微(wēi)球(qiú),近紅外熒(yíng)光染料,聚(jù)苯乙烯(xī)微(wēi)球(qiú),上(shàng)轉換納(nà)米發光(guāng)顆(kē)粒,MRI核(hé)磁(cí)造影(yǐng)產(chǎn)品(pǐn),熒(yíng)光(guāng)蛋(dàn)白(bái)及熒光(guāng)探針等(děng)等(děng)。
溫(wēn)馨提示:供(gōng)應(yīng)產(chǎn)品僅用(yòng)於科(kē)研,不(bù)能(néng)用(yòng)於人體!
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