熒(yíng)光光譜法

• 原理：利(lì)用熒(yíng)光分(fēn)光光(guāng)度計(jì)測量標記前(qián)後血(xiě)紅蛋白溶液的熒光強度(dù)。由(yóu)於(yú)熒光素(sù)標(biāo)記(jì)後會(huì)使血(xiě)紅蛋白(bái)具(jù)有(yǒu)特(tè)定的熒光發射(shè)峰(fēng)，通過(guò)比(bǐ)較標記(jì)前(qián)後(hòu)在相應波長下(xià)的熒(yíng)光強(qiáng)度(dù)變化(huà)，可計算(suàn)出標(biāo)記效率。

• 步驟(zhòu)：首(shǒu)先，用熒光分光光度計對(duì)未標(biāo)記(jì)的(dí)血紅蛋白溶(róng)液進行掃描，確(què)定其本(běn)底熒(yíng)光(guāng)強(qiáng)度(dù)。然(rán)後，對標記後的血紅(hóng)蛋白溶液在熒光素(sù)的特征(zhēng)發射波(bō)長下(xià)進行熒光(guāng)強(qiáng)度(dù)測量。標(biāo)記效(xiào)率可通(tōng)過公(gōng)式(shì)計(jì)算：標(biāo)記效率 =（標記(jì)後(hòu)熒光強(qiáng)度(dù) - 未標(biāo)記(jì)時本底(dǐ)熒(yíng)光強(qiáng)度）/ 理(lǐ)論最大熒光(guāng)強度 ×100%。

凝膠電泳(yǒng)法(fǎ)

• 原(yuán)理：根(gēn)據(jù)標記(jì)與未(wèi)標(biāo)記血紅(hóng)蛋(dàn)白在凝(níng)膠電泳中(zhōng)的遷移率差異來(lái)判斷標記(jì)情況。標記(jì)後的血(xiě)紅(hóng)蛋白(bái)由(yóu)於結合(hé)了(liǎo)熒(yíng)光素，分子量(liáng)會(huì)增(zēng)加(jiā)，在(zài)凝膠(jiāo)中的(dí)遷(qiān)移(yí)速(sù)度會(huì)變慢，通過比較電泳(yǒng)條(tiáo)帶(dài)的位置(zhì)和亮度來(lái)確定(dìng)標記(jì)效(xiào)率(shuài)。

• 步驟：將未標(biāo)記和標(biāo)記(jì)後(hòu)的血(xiě)紅(hóng)蛋(dàn)白樣品進(jìn)行聚(jù)丙烯酰胺(àn)凝膠(jiāo)電(diàn)泳(yǒng)或瓊脂糖凝(níng)膠(jiāo)電泳。電泳結束(shù)後(hòu)，用熒光成(chéng)像(xiàng)儀或紫(zǐ)外燈觀(guān)察凝膠中(zhōng)的(dí)條(tiáo)帶(dài)。如(rú)果標(biāo)記效(xiào)率(shuài)高(gāo)，標記後的血紅蛋白(bái)條帶會(huì)滯(zhì)後(hòu)於(yú)未標(biāo)記的血紅(hóng)蛋白(bái)條(tiáo)帶(dài)，且(qiě)熒(yíng)光(guāng)強度較強。通過對條帶的灰(huī)度值或(huò)熒光強度(dù)進(jìn)行定(dìng)量(liáng)分析(xī)，可計(jì)算出(chū)標記效率(shuài)。

流(liú)式(shì)細(xì)胞術

• 原理：當細(xì)胞(bāo)或顆粒被(bèi)熒光(guāng)素標(biāo)記後，流式細胞(bāo)儀可以檢(jiǎn)測到(dào)其發出的熒光(guāng)信(xìn)號(hào)。通(tōng)過(guò)分析(xī)標記(jì)後(hòu)細胞或(huò)顆(kē)粒的熒(yíng)光強度(dù)分布，與已知標準或未(wèi)標記對照進(jìn)行(háng)比(bǐ)較，從(cóng)而確(què)定(dìng)標記效率(shuài)。

• 步驟：將(jiāng)標記後(hòu)的血(xiě)紅(hóng)蛋白(bái)與(yǔ)適當的細胞(bāo)或微球混(hùn)合，使血(xiě)紅蛋白(bái)結(jié)合(hé)到細胞或微(wēi)球(qiú)表麵。然(rán)後將樣品加(jiā)入流(liú)式細(xì)胞儀(yí)中(zhōng)進(jìn)行(háng)檢測(cè)，設置(zhì)合適的熒光通道和閾值(zhí)，收(shōu)集熒(yíng)光(guāng)信號。根(gēn)據熒光(guāng)陽性(xìng)細胞或微球(qiú)的比(bǐ)例(lì)以及(jí)平均(jūn)熒光(guāng)強度，與未標(biāo)記(jì)對(duì)照組進(jìn)行(háng)對(duì)比(bǐ)，計算出(chū)標(biāo)記效(xiào)率。

酶聯免(miǎn)疫(yì)吸(xī)附測(cè)定法

• 原理(lǐ)：利(lì)用(yòng)抗原 - 抗體特(tè)異(yì)性(xìng)結合(hé)的原理，將標記(jì)有(yǒu)熒(yíng)光(guāng)素的(dí)血(xiě)紅(hóng)蛋白作為(wéi)抗(kàng)原(yuán)，與(yǔ)特異(yì)性抗(kàng)體結合(hé)，再通過(guò)酶標(biāo)二抗與一抗結合(hé)，最(zuì)後通過(guò)酶催化底(dǐ)物顯色，根據顯(xiǎn)色(sè)程(chéng)度來(lái)間(jiān)接(jiē)反(fǎn)映標(biāo)記效(xiào)率。

• 步驟：將未(wèi)標記(jì)和標(biāo)記(jì)後的(dí)血紅(hóng)蛋(dàn)白分(fēn)別包(bāo)被在(zài)酶(méi)標板(bǎn)的(dí)不(bù)同孔(kǒng)中，加入特(tè)異性(xìng)抗體(tǐ)孵育，洗(xǐ)滌後(hòu)加(jiā)入(rù)酶(méi)標(biāo)二(èr)抗繼(jì)續孵育，最(zuì)後(hòu)加入底物顯(xiǎn)色。通(tōng)過酶(méi)標儀(yí)測定各(gè)孔在特(tè)定(dìng)波(bō)長下的吸光度值，標記(jì)效(xiào)率(shuài)可(kě)根(gēn)據標(biāo)記後與(yǔ)未標(biāo)記(jì)樣(yàng)品的吸光(guāng)度比(bǐ)值(zhí)來計(jì)算。

放(fàng)射(shè)性(xìng)核(hé)素標(biāo)記法

• 原理：在(zài)標記反(fǎn)應(yīng)中加入(rù)一定(dìng)量的(dí)放射(shè)性(xìng)核素標(biāo)記的熒光(guāng)素(sù)，通(tōng)過檢(jiǎn)測標記後血紅蛋白的放射性強度，結(jié)合已(yǐ)知加入的放(fàng)射(shè)性核素(sù)總量，計算出標記效率。

• 步(bù)驟：在標(biāo)記反應體(tǐ)係(xì)中加入放射性核素(sù)標(biāo)記(jì)的熒光素(sù)，如(rú)用放(fàng)射性碘(diǎn)（¹²⁵I）標記(jì)的 FITC。標記反(fǎn)應(yīng)完成後，用(yòng)放(fàng)射性(xìng)檢(jiǎn)測儀(yí)測量(liáng)標記(jì)後(hòu)血紅(hóng)蛋白(bái)的放(fàng)射性強(qiáng)度(dù)。根據加入的(dí)放射性(xìng)核(hé)素(sù)總量(liáng)和(hé)實(shí)際檢測到(dào)的放射(shè)性強(qiáng)度(dù)，通過公式(shì)計算標記效率：標記(jì)效(xiào)率 =（標記後樣(yàng)品放射性強度(dù) / 加(jiā)入的(dí)放射(shè)性(xìng)核(hé)素(sù)總放(fàng)射(shè)性強(qiáng)度(dù)）×100%。

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陝西(xī)星(xīng)貝愛(ài)科生(shēng)物(wù)科技經營的產品(pǐn)種類包括有：合(hé)成磷(lín)脂(zhī)
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