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鏈黴(méi)親和素(sù)-吖(yā)啶(dìng)酯(zhǐ)的(dí)製備(bèi)方(fāng)法有(yǒu)哪些

2025-02-25 [164]

鏈(liàn)黴親和(hé)素(sù)-吖(yā)啶(dìng)酯的製備方法主要有以下幾種:

直(zhí)接偶聯法

  • 原理(lǐ):利用(yòng)鏈(liàn)黴親和素(sù)與吖啶酯之間的化學反應(yīng),將兩者(zhě)直接(jiē)連(lián)接(jiē)在(zài)一(yī)起(qǐ)。

  • 操作步(bù)驟:

    • 吖啶酯(zhǐ)的(dí)活化:將(jiāng)吖(yā)啶酯溶解在(zài)適(shì)當的(dí)有機溶劑中,加(jiā)入活化(huà)劑,如(rú)N-羥(qiǎng)基琥珀酰(xiān)亞胺(àn)(NHS)等(děng),在一定(dìng)條件下反(fǎn)應,使吖啶(dìng)酯(zhǐ)的羧基活(huó)化(huà),以便與鏈黴親和素的氨基結合(hé)。

    • 偶(ǒu)聯反應:將活化後的吖(yā)啶酯(zhǐ)溶液與(yǔ)鏈黴(méi)親和(hé)素(sù)溶液(yè)混(hùn)合(hé),在(zài)適宜(yí)的緩(huǎn)衝(chōng)液中(zhōng),控(kòng)製反應溫度(dù)和(hé)時(shí)間(jiān),使吖啶(dìng)酯與鏈(liàn)黴親和素(sù)發生偶聯反應(yīng)。反應(yīng)結束後,通過(guò)透析(xī),離(lí)心等方(fāng)法去除未反(fǎn)應(yīng)的試劑(jì)和雜質,得(dé)到鏈黴(méi)親和(hé)素-吖(yā)啶酯復合(hé)物(wù)。

間(jiān)接偶聯法

  • 原(yuán)理(lǐ):通(tōng)過一個中(zhōng)間(jiān)連(lián)接分子(zǐ),將(jiāng)鏈(liàn)黴親(qīn)和素和吖啶酯連(lián)接(jiē)起來。

  • 操作步(bù)驟:

    • 中間連接分子的選擇(zé)與活(huó)化(huà):選(xuǎn)擇(zé)合適(shì)的(dí)中間(jiān)連接(jiē)分(fēn)子,如雙(shuāng)功(gōng)能交(jiāo)聯劑(jì),一(yī)端(duān)可(kě)以與鏈黴親(qīn)和素(sù)的(dí)氨(ān)基(jī)結合,另(lìng)一端(duān)可(kě)以與(yǔ)吖(yā)啶(dìng)酯(zhǐ)的(dí)羧(suō)基結(jié)合。將(jiāng)中(zhōng)間連接(jiē)分子溶(róng)解(jiě)在(zài)適(shì)當的溶(róng)劑中(zhōng),加(jiā)入活(huó)化(huà)劑進行活化。

    • 與(yǔ)鏈黴(méi)親和(hé)素的偶(ǒu)聯(lián):將(jiāng)活化後的(dí)中(zhōng)間連接分子(zǐ)溶液(yè)與鏈(liàn)黴(méi)親(qīn)和素溶液混(hùn)合,在一(yī)定(dìng)條(tiáo)件下反應(yīng),使(shǐ)中(zhōng)間連(lián)接分(fēn)子(zǐ)與(yǔ)鏈(liàn)黴親(qīn)和素(sù)結合(hé)。

    • 與吖啶(dìng)酯(zhǐ)的偶(ǒu)聯:將上述(shù)反應產物與吖(yā)啶(dìng)酯溶液混(hùn)合,在適(shì)宜的條件(jiàn)下進行(háng)反(fǎn)應,使吖(yā)啶(dìng)酯與(yǔ)中間(jiān)連接(jiē)分子的另一端結合,從(cóng)而形成(chéng)鏈(liàn)黴(méi)親和(hé)素(sù)-吖啶酯(zhǐ)復合物(wù)。最後,通(tōng)過(guò)純(chún)化步驟去(qù)除未反(fǎn)應的物(wù)質。

基於磁珠的(dí)製備(bèi)方法(fǎ)

  • 原(yuán)理(lǐ):利用磁(cí)珠(zhū)表(biǎo)麵(miàn)的(dí)特(tè)定(dìng)官(guān)能團,先將鏈黴(méi)親(qīn)和素固定在磁珠(zhū)上(shàng),再與吖(yā)啶酯(zhǐ)進行(háng)偶(ǒu)聯(lián)。

  • 操作步驟(zhòu):

    • 磁珠的選擇與處理:選擇表麵帶(dài)有(yǒu)羧(suō)基(jī)或Tosyl官(guān)能(néng)團(tuán)的磁(cí)珠(zhū),將(jiāng)其分散在適當(dāng)的(dí)緩(huǎn)衝液(yè)中,加入活(huó)化劑(jì),如EDC等,對磁珠表麵的官能(néng)團進(jìn)行(háng)活化。

    • 鏈(liàn)黴(méi)親和(hé)素(sù)的(dí)固(gù)定(dìng):將鏈黴親(qīn)和素(sù)溶(róng)液(yè)加入到活(huó)化後的磁(cí)珠(zhū)溶液(yè)中,在一定條(tiáo)件(jiàn)下(xià)反應(yīng),使鏈黴親和素(sù)固(gù)定(dìng)在磁(cí)珠表麵。

    • 吖(yā)啶酯的偶聯:將固定(dìng)有鏈(liàn)黴親(qīn)和(hé)素的磁(cí)珠(zhū)與(yǔ)吖啶(dìng)酯溶(róng)液混合,在(zài)適宜的(dí)條(tiáo)件下(xià)進行(háng)反應,使(shǐ)吖啶(dìng)酯(zhǐ)與鏈黴親(qīn)和素(sù)結合。反(fǎn)應(yīng)結束(shù)後,通(tōng)過(guò)磁(cí)性(xìng)分離等(děng)方(fāng)法(fǎ)收(shōu)集(jí)磁(cí)珠(zhū),並用(yòng)緩(huǎn)衝(chōng)液(yè)洗(xǐ)滌,去除未結(jié)合(hé)的物(wù)質,得(dé)到鏈(liàn)黴親和素-吖啶酯(zhǐ)-磁珠(zhū)復(fù)合物。

關於我們(mén):

陝(shǎn)西星貝愛科生(shēng)物(wù)科技(jì)經(jīng)營(yíng)的產品(pǐn)種(zhǒng)類包括有:合成磷脂,高分子聚(jù)乙(yǐ)二醇衍(yǎn)生物(wù),嵌(qiàn)段(duàn)共(gòng)聚物(wù),磁性納(nà)米(mǐ)顆(kē)粒,納(nà)米(mǐ)金及(jí)納米金(jīn)棒(bàng),近紅外熒(yíng)光染料,活性熒(yíng)光染(rǎn)料,熒光標(biāo)記物(wù),蛋白交(jiāo)聯劑,小(xiǎo)分子PEG衍生物,點擊化(huà)學(xué)產品,樹(shù)枝狀(zhuàng)聚合物(wù),環(huán)糊(hū)精衍生物,大(dà)環配體類(lèi),熒光量子點,透(tòu)明(míng)質酸衍(yǎn)生物,石墨烯(xī)或(huò)氧化石(shí)墨烯,碳納米管,富勒(lè)烯(xī),二(èr)氧化(huà)矽及(jí)介孔二氧(yǎng)化(huà)矽(guī),聚(jù)合物(wù)微球(qiú),近紅外熒光染(rǎn)料(liào),聚(jù)苯乙烯微(wēi)球,上轉(zhuǎn)換(huàn)納米(mǐ)發光顆粒,MRI核(hé)磁造影產品,熒(yíng)光蛋(dàn)白(bái)及熒(yíng)光(guāng)探(tàn)針(zhēn)等等。

溫馨(xīn)提示(shì):供(gōng)應產品(pǐn)僅(jǐn)用於(yú)科(kē)研,不(bù)能(néng)用於(yú)人體!

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