Biotin-NHS Ester,生(shēng)物素-N-羥基琥珀(pò)酰亞胺酯(zhǐ)的特點
2026-05-13
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一,基(jī)本信息
Biotin-NHS Ester,也稱生(shēng)物(wù)素(sù)-N-羥(qiǎng)基(jī)琥(hǔ)珀(pò)酰(xiān)亞(yà)胺(àn)酯(CAS: 35013-72-0),胺反(fǎn)應性生(shēng)物素化試(shì)劑。分子(zǐ)量341.38,外(wài)觀(guān)為白(bái)色至(zhì)類(lèi)白色固體。它的(dí)核(hé)心結(jié)構非(fēi)常(cháng)簡潔,僅由(yóu)三部分(fēn)組(zǔ)成:生(shēng)物素基(jī)團(功(gōng)能核心),短鏈連接臂(減少(shǎo)空(kōng)間(jiān)位(wèi)阻)和(hé)NHS酯(zhǐ)活(huó)性(xìng)端(反應手(shǒu)柄(bǐng))。
二(èr),反(fǎn)應特性(xìng)
NHS酯(zhǐ)端具有(yǒu)高度活(huó)潑的羧(suō)基活化特性(xìng),可在(zài)pH 7.2-8.5的(dí)中性(xìng)至(zhì)弱鹼(jiǎn)性緩(huǎn)衝液中(zhōng),與(yǔ)蛋白質,多肽(tài)等分(fēn)子上的(dí)伯氨(ān)基(jī)(主要(yào)是(shì)賴氨酸ε-氨基和N-末(mò)端(duān)α-氨(ān)基)發(fā)生特(tè)異(yì)性(xìng)親(qīn)核(hé)取(qǔ)代反(fǎn)應,形(xíng)成穩定(dìng)的,不(bù)可(kě)逆的酰胺鍵(jiàn)。反應條(tiáo)件(jiàn)溫和(hé),無(wú)需(xū)額外(wài)縮合劑(jì),室溫下30分鐘至(zhì)2小時即可完成,不會損(sǔn)傷敏(mǐn)感的(dí)生物(wù)分(fēn)子。
三(sān),生物素識(shí)別特性(xìng)
生物素端可(kě)與(yǔ)鏈黴親和素(sù)(Streptavidin)或親和素(sù)(Avidin)發(fā)生(shēng)較高親(qīn)和力的(dí)非共(gòng)價結合,解離常(cháng)數(shù)Kd≈10⁻¹⁵ M,是已知較(jiào)強(qiáng)的(dí)非(fēi)共(gòng)價生物分(fēn)子相互作(zuò)用(yòng)之一。這(zhè)一特性使其成(chéng)為(wéi)分子標記,捕獲和信(xìn)號放(fàng)大實(shí)驗中的理想(xiǎng)工(gōng)具。短鏈連(lián)接臂在(zài)保證(zhèng)反應(yīng)活性的(dí)同時(shí),減少了空(kōng)間位(wèi)阻(zǔ)對生(shēng)物(wù)素-親(qīn)和素結(jié)合的影(yǐng)響,確保標(biāo)記(jì)後(hòu)仍能高效結(jié)合。
四(sì),溶解(jiě)性(xìng)特(tè)點(diǎn)
由於不(bù)含PEG鏈和磺酸基(jī)等親水(shuǐ)修飾(shì),它在水中不(bù)溶,必(bì)須用有(yǒu)機(jī)溶(róng)劑(jì)(如DMSO或DMF)溶(róng)解後(hòu)再(zài)加入水性反(fǎn)應(yīng)體(tǐ)係。實驗(yàn)中最終有機溶劑濃(nóng)度通常控製(zhì)在(zài)5%-10%以(yǐ)內,以(yǐ)免影(yǐng)響蛋白(bái)質活(huó)性(xìng)。相比之下,含(hán)PEG鏈(liàn)的衍生(shēng)物(如Biotin-PEG12-NHS)可(kě)直(zhí)接溶於(yú)水或PBS,操(cāo)作(zuò)更簡便。
五,標記後(hòu)的優缺(quē)點(diǎn)
優點方(fāng)麵(miàn):分(fēn)子(zǐ)量小(僅增加約341 Da),對標記後(hòu)蛋白質(zhì)的結構(gòu)和活性影(yǐng)響最小(xiǎo);短(duǎn)鏈(liàn)設計使(shǐ)標(biāo)記(jì)效(xiào)率(shuài)高,操作簡單,成(chéng)本低(dī)廉。
缺(quē)點方麵:由於缺(quē)少(shǎo)長鏈間(jiān)隔(gé)臂,生(shēng)物素(sù)可(kě)能因空間位(wèi)阻(zǔ)被蛋(dàn)白質(zhì)表麵遮擋(dǎng),導致(zhì)與(yǔ)鏈黴親(qīn)和素的結合(hé)效率(shuài)不(bù)如(rú)含LC或PEG鏈的(dí)衍(yǎn)生(shēng)物;標記(jì)後的(dí)蛋白質(zhì)在溶液(yè)中儲存時(shí)容(róng)易聚集沉澱,不適合長期(qī)保(bǎo)存(cún)。
六,穩(wěn)定(dìng)性(xìng)與存儲
幹燥粉(fěn)末狀(zhuàng)態(tài)下(xià)化(huà)學性質(zhì)穩(wěn)定(dìng),在-20°C避光(guāng),密封(fēng),幹燥條件(jiàn)下可長(cháng)期保(bǎo)存(通(tōng)常(cháng)12個月以(yǐ)上(shàng))。但NHS酯對水和濕氣極度敏感,在水溶液(yè)中會迅速水(shuǐ)解(jiě)生(shēng)成無活性的(dí)生(shēng)物素(sù)羧(suō)酸(suān),因(yīn)此(cǐ)必須(xū)現用現配,不可提(tí)前(qián)配製(zhì)儲(chǔ)存(cún)液。使(shǐ)用前需(xū)將試劑瓶平衡(héng)至室溫(wēn)再打(dǎ)開,避(bì)免冷凝水(shuǐ)進入導(dǎo)致水解。
關於(yú)我(wǒ)們(mén):
陝西(xī)星貝(bèi)愛(ài)科(kē)生物科技經營的產(chǎn)品種(zhǒng)類(lèi)包(bāo)括(kuò)有(yǒu):合(hé)成磷脂,高(gāo)分(fēn)子聚乙二(èr)醇衍生物,嵌段共(gòng)聚物,磁性納米顆粒,納(nà)米金(jīn)及(jí)納米金(jīn)棒,近紅(hóng)外熒光染料(liào),活(huó)性(xìng)熒光染(rǎn)料(liào),熒光標記(jì)物,蛋白交(jiāo)聯(lián)劑(jì),小分子(zǐ)PEG衍生(shēng)物,點擊化學(xué)產品,樹枝(zhī)狀聚(jù)合(hé)物,環糊(hū)精衍生物,大環配體類,熒(yíng)光量(liáng)子點(diǎn),透明質酸衍生物,石墨(mò)烯(xī)或氧(yǎng)化石(shí)墨烯(xī),碳(tàn)納(nà)米管(guǎn),富勒(lè)烯,二氧(yǎng)化矽及介(jiè)孔二氧化(huà)矽(guī),聚合(hé)物微球(qiú),近(jìn)紅外熒(yíng)光染料(liào),聚苯(běn)乙(yǐ)烯(xī)微(wēi)球(qiú),上轉換(huàn)納米發(fā)光(guāng)顆粒,MRI核磁(cí)造影產(chǎn)品,熒光(guāng)蛋(dàn)白及熒光(guāng)探針等等。
溫馨提示:供應產(chǎn)品(pǐn)僅(jǐn)用於科研,不能(néng)用(yòng)於人(rén)體(tǐ)!
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