Biotin-PEG2-Amine 的用(yòng)途(tú)
2026-05-14
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Biotin-PEG2-Amine 的用(yòng)途
Biotin-PEG2-Amine(CAS: 138529-46-1,分子式C₁₆H₃₀N₄O₄S,分子量374.49)是一種將(jiāng)生物素(sù)(Biotin),二聚乙二(èr)醇(chún)鏈(PEG2)和(hé)末端伯(bó)氨(ān)基(-NH₂)三(sān)個(gè)功能模(mó)塊(kuài)集(jí)於一體的(dí)雙(shuāng)功能(néng)生物素(sù)衍(yǎn)生物(wù)。其核心價(jià)值(zhí)在於:生(shēng)物(wù)素(sù)端提(tí)供(gōng)與鏈(liàn)黴親和素(sù)(Streptavidin)/親和(hé)素(sù)(Avidin)的(dí)較高親和(hé)力(lì)結合能(néng)力(Kd≈10⁻¹⁵ M),PEG2鏈(liàn)提供優(yōu)良的水溶(róng)性和抗非(fēi)特異性吸(xī)附特性,末端氨基則提(tí)供靈活(huó)的化學偶(ǒu)聯(lián)活性位點。這一結構(gòu)使其在(zài)科(kē)研(yán)領(lǐng)域(yù)擁(yōng)有極為廣泛(fàn)的應用。
一(yī),蛋白質(zhì)與多(duō)肽的生(shēng)物素(sù)化標記
利用末端(duān)氨(ān)基(jī)可(kě)與蛋白質(zhì)或多肽(tài)上的(dí)羧基(經EDC/NHS活(huó)化(huà)後(hòu))發生(shēng)酰胺化反應(yīng),將生物素(sù)引入目標蛋白(bái)。PEG2鏈的引入賦予了(liǎo)標記蛋白(bái)優(yōu)良的(dí)水(shuǐ)溶(róng)性,同(tóng)時其形成的水化層能有效屏蔽(bì)非(fēi)特(tè)異性蛋(dàn)白吸(xī)附,降低(dī)背(bèi)景(jǐng)噪(zào)音(yīn),使信噪比(bǐ)顯(xiǎn)著提高。標記後的(dí)蛋白可通過鏈黴(méi)親和素(sù)偶聯物(如磁(cí)珠,熒光(guāng)探針(zhēn),酶(méi)標物(wù))實(shí)現以(yǐ)下(xià)操(cāo)作(zuò):
ELISA檢(jiǎn)測:作(zuò)為捕獲或檢(jiǎn)測探針,實現(xiàn)高(gāo)靈敏(mǐn)度的免疫(yì)分析(xī)。
Western Blot:通(tōng)過(guò)親(qīn)和素(sù)-HRP或(huò)親(qīn)和素-熒光(guāng)復(fù)合物(wù)進行信號放大(dà)與檢測。
免疫(yì)沉澱(diàn)(Pull-down):利(lì)用親和素(sù)磁(cí)珠或瓊(qióng)脂糖(táng)珠(zhū)從復雜混(hùn)合物(wù)中富集(jí)目(mù)標蛋(dàn)白。
流(liú)式(shì)細胞分(fēn)析(xī):標(biāo)記(jì)細(xì)胞(bāo)表麵(miàn)蛋(dàn)白,進(jìn)行(háng)定量(liáng)分(fēn)析(xī)和(hé)分選。
由(yóu)於(yú)PEG2鏈的空間(jiān)緩(huǎn)衝(chōng)設(shè)計(jì),標記後蛋(dàn)白(bái)的天(tiān)然(rán)活性(xìng)和(hé)結合(hé)能(néng)力(lì)不受明(míng)顯(xiǎn)影響,偶聯效率(shuài)通常(cháng)大(dà)於(yú)80%。
二,抗體修飾
Biotin-PEG2-Amine可作(zuò)為抗(kàng)體(tǐ)修(xiū)飾(shì)劑(jì),將生物(wù)素引(yǐn)入抗體後(hòu),利用(yòng)生物素(sù)-鏈(liàn)黴親(qīn)和(hé)素係統的多級信號(hào)放大(dà)效應,可(kě)顯著提高(gāo)免(miǎn)疫檢測(cè)的(dí)靈(líng)敏度和特異性(xìng)。PEG2鏈的存在(zài)還能(néng)降(jiàng)低(dī)抗(kàng)體聚集和(hé)非特異(yì)性結(jié)合,使抗(kàng)體(tǐ)在免(miǎn)疫分析中(zhōng)表現更為(wéi)穩定。該(gāi)技術在蛋(dàn)白(bái)質研究,抗體檢(jiǎn)測和免疫分析中尤為(wéi)重要。
三(sān),核酸標記(jì)與基因檢(jiǎn)測(cè)
與寡核苷酸(suān)偶聯後(hòu),可(kě)生成(chéng)生物(wù)素標記探(tàn)針(zhēn),用(yòng)於以(yǐ)下核酸分(fēn)析實(shí)驗:
原位(wèi)雜(zá)交檢測(ISH):構建生物(wù)素(sù)化DNA/RNA探(tàn)針(zhēn),用於基因(yīn)芯片分析(xī)。
Southern/Northern Blot:提高雜交效(xiào)率和(hé)特(tè)異性。
熒(yíng)光(guāng)原位雜交(FISH):利(lì)用(yòng)生物素-親(qīn)和素係統實現(xiàn)信(xìn)號放大。
PEG2鏈(liàn)的(dí)水(shuǐ)溶性使標(biāo)記探針(zhēn)在水(shuǐ)性(xìng)緩衝液中更(gēng)穩(wěn)定(dìng),減少探針聚(jù)集,提(tí)高雜(zá)交效(xiào)率。氨基(jī)可與核酸(suān)上(shàng)經(jīng)高碘酸(suān)鈉氧(yǎng)化產生的醛基發生(shēng)還(huán)原(yuán)胺化(huà)反應,實現(xiàn)生(shēng)物(wù)素(sù)化核酸探針的製備。
四,Pull-down與親和純(chún)化(huà)
標記(jì)後的生(shēng)物分(fēn)子(zǐ)(蛋白質(zhì),核酸,小(xiǎo)分(fēn)子(zǐ)復合(hé)物(wù)等)可通過鏈黴親(qīn)和(hé)素磁珠或瓊(qióng)脂糖(táng)珠(zhū)從復(fù)雜混合(hé)物中(zhōng)高效富集目標(biāo)分子(zǐ),隨後(hòu)用(yòng)於(yú)質(zhì)譜(pǔ)分(fēn)析,測(cè)序(xù)或功能研究。PEG2鏈的(dí)抗非(fēi)特異性吸附特性使純化(huà)過程中(zhōng)背景(jǐng)更低,回(huí)收率更高(gāo),是蛋白(bái)質(zhì)組(zǔ)學研(yán)究(jiū)中修飾目(mù)標(biāo)蛋(dàn)白(bái),實現(xiàn)高(gāo)效分(fēn)離純化與(yǔ)鑒定的(dí)重要(yào)工具。
五,PROTAC技術(shù)中(zhōng)的連接(jiē)體(Linker)
Biotin-PEG2-Amine在PROTAC(蛋白裂解(jiě)靶(bǎ)向(xiàng)嵌(qiàn)合(hé)體)技(jì)術(shù)中(zhōng)展示了重要的應用價值。PROTAC分子由E3泛素連(lián)接(jiē)酶(méi)配體(tǐ),靶蛋白(bái)配體以及連接兩者的(dí)linker三部分組(zǔ)成。Biotin-PEG2-Amine可(kě)作(zuò)為linker的(dí)一(yī)部(bù)分,通過其生物(wù)素部分與(yǔ)鏈黴親和素或其他親和(hé)素結(jié)合,利(lì)用細(xì)胞內(nèi)泛素-蛋(dàn)白酶體係(xì)統實現(xiàn)靶(bǎ)蛋白的泛素化降解(jiě)。PEG2鏈提供了(liǎo)適當(dāng)的(dí)空間(jiān)柔性(xìng),確(què)保PROTAC分子的兩端(duān)配體能(néng)同時與各自(zì)靶點(diǎn)有效(xiào)結合(hé)。
六(liù),納(nà)米(mǐ)材(cái)料與(yǔ)藥(yào)物(wù)載(zǎi)體功(gōng)能化
可(kě)在納(nà)米顆粒(lì),脂(zhī)質(zhì)體,聚(jù)合(hé)物載體(tǐ)或(huò)金納(nà)米(mǐ)粒(lì)表麵引(yǐn)入生(shēng)物素功(gōng)能,實現(xiàn):
靶(bǎ)向藥物(wù)遞(dì)送:通(tōng)過生物素與特定(dìng)細胞(bāo)表麵(miàn)受(shòu)體(如轉鐵蛋白受體(tǐ))的相(xiāng)互作(zuò)用,或預先在靶組織表(biǎo)達親和素,實現(xiàn)藥(yào)物在靶部(bù)位的選擇性(xìng)積累,提(tí)高療(liáo)效(xiào)並(bìng)降低全身(shēn)副作(zuò)用。
納(nà)米載(zǎi)體(tǐ)示蹤:通過生物(wù)素-熒光鏈黴親和素(sù)復合物(wù)對納米載體(tǐ)進行可(kě)視(shì)化追蹤(zōng),研究其體(tǐ)內(nèi)分布(bù)和代謝路徑(jìng)。
膠(jiāo)體(tǐ)穩定(dìng)性(xìng)提升(shēng):PEG2鏈的引(yǐn)入(rù)有助於(yú)提(tí)高納米粒子(zǐ)的(dí)穩(wěn)定性(xìng)和(hé)生(shēng)物相容(róng)性,減少(shǎo)蛋白(bái)冠(guān)形成,改(gǎi)善其在生(shēng)物(wù)學中(zhōng)的應用(yòng)效果(guǒ)。
藥物遞(dì)送係(xì)統(tǒng)構建:修(xiū)飾(shì)藥(yào)物分子或(huò)載體表(biǎo)麵,使其(qí)帶有生(shēng)物(wù)素功能(néng),實現藥物的(dí)靶(bǎ)向遞送和(hé)可控釋放(fàng)。
七,細胞表麵標記與成像
由於PEG2鏈(liàn)使分子具(jù)有膜不(bù)可滲透的特(tè)性(xìng),Biotin-PEG2-Amine特別適合標(biāo)記(jì)細(xì)胞表麵的(dí)生(shēng)物分(fēn)子,用(yòng)於(yú)研究細胞表麵(miàn)分子的功能和相互作用。結(jié)合熒光標記的鏈黴(méi)親和(hé)素(sù),可(kě)實現(xiàn)細(xì)胞追蹤(zōng)和熒光(guāng)成像,用於免疫熒(yíng)光實驗等(děng)免(miǎn)疫學研究和細(xì)胞(bāo)生物(wù)學研究。
八,生物傳(chuán)感(gǎn)器(qì)與診斷平(píng)台
利(lì)用(yòng)生物素-親(qīn)和(hé)素(sù)的高(gāo)特異性結(jié)合(hé),Biotin-PEG2-Amine可(kě)用於:
生(shēng)物(wù)芯片(piàn)表麵修飾(shì):在芯(xīn)片表麵固定生(shēng)物素化(huà)捕獲分(fēn)子(zǐ)(如(rú)抗(kàng)體(tǐ),核酸(suān)探(tàn)針),用(yòng)於高(gāo)通量檢測(cè),提(tí)高檢(jiǎn)測特(tè)異性和(hé)靈敏度。
電化學/光(guāng)學傳(chuán)感(gǎn)器(qì)構(gòu)建:作(zuò)為(wéi)信(xìn)號識(shí)別元(yuán)件,PEG2鏈的抗非特(tè)異性吸(xī)附(fù)特性進一步(bù)提升傳感(gǎn)器的(dí)信噪比。
體外診斷試劑(jì)開發:用於臨床(chuáng)樣本(běn)中特定生(shēng)物標誌物的(dí)高(gāo)靈敏檢測(cè)。
九,偶聯(lián)化學與材(cái)料(liào)改性(xìng)
Biotin-PEG2-Amine在偶聯反應中用(yòng)作連接劑,能夠(gòu)將(jiāng)生物(wù)素(sù)連接到各種(zhǒng)分子(zǐ)如(rú)抗(kàng)體,酶或小配(pèi)體(tǐ)上。這種偶聯技術廣泛應用(yòng)於(yú)生物傳感器和遞(dì)送係(xì)統(tǒng)的開發(fā)中(zhōng)。氨基(jī)末端可(kě)與羧基,酰氯(lǜ),活性(xìng)酯(NHS酯),醛基(jī),酸酐,環(huán)氧基(jī)團等(děng)多(duō)種(zhǒng)官能團(tuán)發生共價(jià)反(fǎn)應,實現生(shēng)物(wù)素(sù)向(xiàng)目(mù)標(biāo)分子(zǐ)的(dí)精(jīng)準(zhǔn)引(yǐn)入(rù)。
在(zài)材(cái)料(liào)科學(xué)領域,可用於(yú)修飾納米顆粒(lì)表(biǎo)麵,通(tōng)過與(yǔ)納(nà)米(mǐ)顆粒表(biǎo)麵(miàn)的羧基(jī)反(fǎn)應實現功(gōng)能(néng)化修飾,賦(fù)予納(nà)米顆粒生物(wù)素特異性結(jié)合(hé)能(néng)力(lì),可(kě)用(yòng)於生(shēng)物傳(chuán)感器,藥(yào)物遞(dì)送係統等領(lǐng)域(yù)。也(yě)可用(yòng)於(yú)3D生物(wù)打(dǎ)印水(shuǐ)凝(níng)膠,智能材料構建(jiàn)(如(rú)pH/酶(méi)響(xiǎng)應性釋放(fàng))等前沿(yán)方向。
十,藥物遞送係(xì)統中的靶向(xiàng)修(xiū)飾(shì)
利用生物素受體(tǐ)介導的(dí)細胞攝取(qǔ)機製(zhì),Biotin-PEG2-Amine可(kě)用於構(gòu)建靶向特定細胞(bāo)或組織(zhī)的(dí)藥物(wù)遞送係(xì)統。通(tōng)過修(xiū)飾(shì)藥(yào)物(wù)分(fēn)子或載體表(biǎo)麵(miàn),使其(qí)帶(dài)有(yǒu)生物素功(gōng)能(néng),從而實(shí)現(xiàn)藥物(wù)的主動(dòng)靶向運輸和(hé)可控(kòng)釋放(fàng)。PEG2鏈的(dí)引(yǐn)入(rù)增強(qiáng)了(liǎo)分(fēn)子的(dí)生物(wù)相容性(xìng),降低了免(miǎn)疫(yì)原(yuán)性,延(yán)長了(liǎo)體(tǐ)內循環時(shí)間,降(jiàng)低了(liǎo)毒(dú)副作(zuò)用。
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溫(wēn)馨(xīn)提示(shì):供(gōng)應產(chǎn)品僅用於科(kē)研,不能用於人(rén)體!
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