Biotin-PEG3-SS-CONH-DBCO的特點有哪(nǎ)些
2026-06-17
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1. 無需(xū)銅(tóng)催化的(dí)點(diǎn)擊(jī)化學(xué)(DBCO端(duān))
DBCO與疊氮(dàn)基(jī)(-N₃)發生SPAAC反應,全程(chéng)不(bù)需要銅催(cuī)化劑(jì)。銅(tóng)催化會損(sǔn)傷(shāng)活細(xì)胞和蛋白質活性,DBCO全(quán)規避(bì)了這個問題(tí),活細胞,體(tǐ)內實(shí)驗都能(néng)用。
2. 還(huán)原(yuán)敏感,可控斷裂(SS二(èr)硫(liú)鍵(jiàn))
二硫鍵在(zài)DTT,TCEP或細胞(bāo)內(nèi)高濃度(dù)穀(gǔ)胱甘(gān)肽(GSH,約2–10 mM)環(huán)境(jìng)下斷裂,實現(xiàn)"偶聯(lián)-運輸(shū)-斷裂-釋放"的(dí)時序(xù)控(kòng)製(zhì)。細胞外(wài)穩定,細(xì)胞內解離。
3. 較強親和捕(bǔ)獲(Biotin端)
Biotin與鏈黴親和素(sù)的結合(hé)常數Kd≈10⁻¹⁵ M,已知較(jiào)強(qiáng)非共價生物(wù)分(fēn)子相互(hù)作用。偶(ǒu)聯(lián)完成(chéng)後可通過(guò)鏈(liàn)黴親和素(sù)磁珠(zhū)/柱(zhù)一步(bù)純(chún)化,也可用於ELISA,Western blot等檢測(cè)。
4. PEG3短鏈(liàn)間隔臂,平(píng)衡柔(róu)性與效(xiào)率
PEG3(三聚(jù)乙(yǐ)二醇)提(tí)供適度(dù)的親水間隔(gé),減少空(kōng)間位阻(zǔ),提(tí)升DBCO與疊氮基的(dí)反應(yīng)效(xiào)率(shuài)。相比PEG6,PEG12,PEG3鏈更(gēng)短(duǎn),反應(yīng)動(dòng)力學更(gēng)快,不會過(guò)度(dù)稀釋(shì)有效濃度。
5. 酰胺(àn)鍵穩定(dìng)連接(CONH)
CONH(酰(xiān)胺(àn)鍵)是生物體(tǐ)內(nèi)較(jiào)穩(wěn)定的共價鍵之一(yī),在(zài)生理pH和溫(wēn)度(dù)下(xià)不水(shuǐ)解(jiě),保(bǎo)證Biotin與(yǔ)DBCO兩個功(gōng)能(néng)端在(zài)運輸(shū)和(hé)反(fǎn)應過程中不(bù)會脫落。
6. 一試(shì)劑三(sān)功(gōng)能,模塊(kuài)化設計(jì)
一端抓靶標(DBCO-N₃點擊化學),一端掛(guà)生物(wù)素(sù)(親和(hé)捕獲(huò)),中間(jiān)可斷裂(SS還原(yuán)響應(yīng))。不需要分別購買(mǎi)三種試(shì)劑再(zài)組(zǔ)裝,一步完(wán)成"標記+捕獲+可控(kòng)釋(shì)放"三重功能。
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