PC Biotin-PEG3-alkyne 的製備方(fāng)法(fǎ)

PC 即 Photocleavable（光可(kě)裂解），指(zhǐ)生(shēng)物(wù)素(sù)部分(fēn)含(hán)光(guāng)裂(liè)解(jiě)基團，365 nm 紫外光(guāng)照(zhào)射下(xià)可釋(shì)放(fàng)捕獲(huò)的生(shēng)物分(fēn)子(zǐ)。CAS號(hào)：1869922-24-6，分子量(liáng) 780.89，純(chún)度通常 ≥95%。

製(zhì)備方(fāng)法(fǎ)

方法(fǎ)一：經(jīng)典酰胺偶聯法

第(dì)一步，PC-生(shēng)物(wù)素(sù)羧基用 EDC/NHS 活化(huà)，生成 PC-生物(wù)素(sù)-NHS 酯，pH 6.5–7.5，室(shì)溫，DMF中。第(dì)二(èr)步，PC-生物素(sù)-NHS 酯與 H₂N-PEG3-alkyne 在(zài) pH 7.0–8.0 緩(huǎn)衝(chōng)液中(zhōng)偶(ǒu)聯(lián)，生成酰胺鍵(jiàn)，室(shì)溫(wēn)反應(yīng) 4–12 小(xiǎo)時。第(dì)三(sān)步，C18 反相柱(zhù)層析或(huò) HPLC 純化，真空(kōng)幹燥。總收(shōu)率(shuài) 55–75%。

方(fāng)法(fǎ)二：NHS 碳(tàn)酸(suān)酯法

PC-生(shēng)物(wù)素與雙(shuāng)琥(hǔ)珀(pò)酰(xiān)亞胺碳酸(suān)酯(zhǐ)（DSC）反應生成(chéng) NHS 碳酸酯中(zhōng)間體，再與(yǔ) H₂N-PEG3-alkyne 偶聯(lián)生(shēng)成氨基(jī)甲酸酯(zhǐ)鍵(jiàn)。優點是(shì)副反應(yīng)少(shǎo)，不易(yì)消旋(xuán)。

方法三：點(diǎn)擊化學後接法

先用(yòng) PC-生(shēng)物(wù)素(sù)-NHS 酯與 H₂N-PEG3-N₃ 偶聯得(dé)到(dào) PC-Biotin-PEG3-azide，再(zài)通(tōng)過丙炔酸對末(mò)端進(jìn)行炔(quē)基(jī)化。適(shì)合(hé)同時(shí)製(zhì)備 azide/alkyne 兩(liǎng)種(zhǒng)產品的實(shí)驗(yàn)室。

方(fāng)法(fǎ)四：固相合成法

以 Wang 樹(shù)脂(zhī)為載體(tǐ)，從(cóng) C 端(duān)向(xiàng) N 端(duān)逐(zhú)步偶聯(lián)炔基(jī)丙(bǐng)氨酸，PEG3 單元，PC-生(shēng)物素(sù)，最(zuì)後(hòu) TFA 切割(gē)，HPLC 純化。適合快速(sù)構建類似物庫(kù)，但(dàn)成(chéng)本高。

關鍵控(kòng)製點

全程(chéng)避(bì)光(guāng)，PC 基團對(duì)紫(zǐ)外光敏感。溫度(dù)控(kòng)製(zhì)在 0–30℃，重氮/光裂解基團熱(rè)穩(wěn)定(dìng)性(xìng)差。溶劑用(yòng)無(wú)水(shuǐ) DMF 或 DMSO，水(shuǐ)會(huì)導(dǎo)致(zhì) NHS 酯(zhǐ)水解。pH 保持 7.0–8.5，過(guò)低(dī) NHS 酯(zhǐ)水解(jiě)，過高(gāo)生(shēng)物(wù)素(sù)脲基環開環。氮(dàn)氣(qì)保(bǎo)護，末端炔(quē)基(jī)易(yì)氧(yǎng)化。必(bì)須 HPLC 純化，去(qù)除未反應(yīng)的 PC-生物素。

重(zhòng)要提(tí)示(shì)

僅供(gōng)科研使(shǐ)用(yòng)，不可(kě)用於(yú)人(rén)體(tǐ)。全程避(bì)光操(cāo)作，DMSO 溶(róng)解後現配(pèi)現用，避免反(fǎn)復凍融(róng)。廢(fèi)液按(àn)有(yǒu)毒化學(xué)廢(fèi)棄物(wù)處(chǔ)理(lǐ)。

關於我們:

陝西(xī)星(xīng)貝(bèi)愛科生物科技經營的(dí)產品(pǐn)種類(lèi)包括有：合(hé)成(chéng)磷脂，高分(fēn)子(zǐ)聚乙(yǐ)二(èr)醇衍(yǎn)生物，嵌(qiàn)段共聚物(wù)，磁(cí)性(xìng)納(nà)米顆(kē)粒(lì)，納米(mǐ)金(jīn)及(jí)納米(mǐ)金棒(bàng)，近紅外熒(yíng)光染(rǎn)料(liào)，活性熒(yíng)光染料，熒(yíng)光標記物(wù)，蛋白交聯(lián)劑(jì)，小分子PEG衍生物，點(diǎn)擊化學產品，樹枝狀(zhuàng)聚合(hé)物，環(huán)糊精(jīng)衍(yǎn)生(shēng)物，大(dà)環配(pèi)體(tǐ)類，熒(yíng)光量(liáng)子點(diǎn)，透明(míng)質酸衍生物(wù)，石墨烯(xī)或氧化石(shí)墨(mò)烯，碳(tàn)納(nà)米(mǐ)管(guǎn)，富勒烯(xī)，二氧(yǎng)化(huà)矽及介(jiè)孔二(èr)氧化矽，聚合物(wù)微(wēi)球，近紅外熒光染料，聚苯乙(yǐ)烯微(wēi)球(qiú)，上(shàng)轉(zhuǎn)換納(nà)米(mǐ)發(fā)光顆(kē)粒，MRI核(hé)磁造影產品，熒光蛋(dàn)白(bái)及熒(yíng)光(guāng)探針等等。

溫(wēn)馨提(tí)示：供應產品僅用於(yú)科(kē)研，不能(néng)用於(yú)人體！

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