蛋白A磁珠是一(yī)種結合了蛋白A與磁(cí)性微(wēi)球的(dí)生物分(fēn)離工具，廣泛應用於抗(kàng)體(tǐ)或抗(kàng)原(yuán)的(dí)分(fēn)離，純(chún)化及免疫沉澱(diàn)等實(shí)驗(yàn)。

一(yī)，組(zǔ)成(chéng)與結構

• 磁性微球：通常為納(nà)米(mǐ)級，具有(yǒu)超順磁(cí)性。在(zài)外(wài)加(jiā)磁(cí)場(cháng)作用下，磁(cí)珠可快速聚(jù)集和(hé)分離；去除磁(cí)場後(hòu)，又能重新(xīn)分散。這種特(tè)性使得磁珠(zhū)在實(shí)驗(yàn)操(cāo)作中(zhōng)極(jí)為便捷，無(wú)需離心即可(kě)實現(xiàn)固液分(fēn)離。

• 蛋(dàn)白A：一種發(fā)現於(yú)金黃(huáng)色葡萄(táo)球菌細(xì)胞壁(bì)表麵(miàn)的蛋(dàn)白(bái)，分(fēn)子(zǐ)量(liáng)約為(wéi)42kDa。蛋白A能與(yǔ)多數(shù)哺(bǔ)乳動(dòng)物IgG的Fc端特異(yì)性結(jié)合，而(ér)不(bù)影(yǐng)響IgG的(dí)Fab段(duàn)與(yǔ)抗(kàng)原的結(jié)合活(huó)性。這(zhè)種特(tè)異性(xìng)結(jié)合(hé)能(néng)力(lì)是(shì)蛋(dàn)白(bái)A磁(cí)珠(zhū)實現(xiàn)抗(kàng)體或抗原(yuán)分(fēn)離純(chún)化的關(guān)鍵。

二(èr)，工(gōng)作(zuò)原理

蛋白(bái)A磁(cí)珠利用蛋白A與IgG的Fc端(duān)特異性結合(hé)的特(tè)性(xìng)，當與含有(yǒu)目標抗體(tǐ)或抗原(yuán)的樣品(pǐn)混(hùn)合(hé)時，蛋(dàn)白A磁珠(zhū)會與(yǔ)相應(yīng)的抗體(tǐ)或(huò)抗原-抗(kàng)體(tǐ)復(fù)合物結合。然後，通過(guò)磁(cí)力架(jià)等(děng)磁分離設備，將(jiāng)結合了目標物質的磁珠分(fēn)離(lí)出來(lái)，從而(ér)實現(xiàn)對目標物質(zhì)的富集(jí)和純化。

三(sān)，特(tè)性(xìng)與(yǔ)優(yōu)勢

• 特(tè)異(yì)性強(qiáng)：重組(zǔ)蛋白A經過(guò)改造(zào)，僅保(bǎo)留與IgG Fc端(duān)結合(hé)相關(guān)的(dí)氨基酸序列(liè)，去除(chú)了可能導致(zhì)非(fēi)特異性(xìng)結合的序列，能(néng)有效(xiào)減少非(fēi)特(tè)異性(xìng)吸(xī)附。

• 結(jié)合效率高：納米(mǐ)級磁珠(zhū)具(jù)有超大(dà)比表麵(miàn)積，便於與(yǔ)抗(kàng)體(tǐ)或抗(kàng)體(tǐ)復合物(wù)快速有效結合(hé)。通(tōng)常(cháng)10分鐘內即可(kě)完成抗(kàng)體(tǐ)或其(qí)復(fù)合(hé)物的吸(xī)附過(guò)程(chéng)，30分(fēn)鐘(zhōng)內完成(chéng)目(mù)的蛋(dàn)白免(miǎn)疫沉(chén)澱操作。

• 操(cāo)作簡便：無需(xū)離心操作，可通(tōng)過(guò)磁性分(fēn)離快(kuài)速高效地分離磁珠，節省(shěng)實(shí)驗(yàn)時間(jiān)。同時，對靶蛋(dàn)白的物理(lǐ)壓力極(jí)小，適合分離和(hé)濃縮不穩定易分(fēn)解的成分。

• 穩定性好：蛋(dàn)白(bái)A磁(cí)珠(zhū)在(zài)儲存和實(shí)驗(yàn)過(guò)程中(zhōng)表(biǎo)現出良(liáng)好(hǎo)的穩定性(xìng)，能在(zài)較(jiào)寬(kuān)的溫度和pH範圍(wéi)內(nèi)保(bǎo)持活性。

四，應用(yòng)領域

• 抗(kàng)體(tǐ)純化：蛋(dàn)白A磁(cí)珠可從(cóng)血清，細(xì)胞(bāo)培(péi)養上(shàng)清(qīng)液(yè)或(huò)腹水(shuǐ)中高效純化(huà)IgG抗體。純化過程簡(jiǎn)單(dān)快速，將樣本(běn)與(yǔ)磁珠在適(shì)宜(yí)的(dí)緩(huǎn)衝液(yè)中(zhōng)孵育一(yī)段(duàn)時(shí)間後(hòu)，蛋白A與IgG結合(hé)，通過(guò)磁(cí)分離(lí)架(jià)去除(chú)上(shàng)清液(yè)，再用酸性洗脫(tuō)液洗(xǐ)脫(tuō)，中(zhōng)和後即(jí)可得到高(gāo)純度(dù)的(dí)IgG抗體(tǐ)。

• 免(miǎn)疫(yì)沉澱（IP）：用(yòng)於(yú)研究蛋白質相互作(zuò)用(yòng)，可(kě)特(tè)異性捕(bǔ)獲(huò)目(mù)標蛋白(bái)及(jí)其復合物。蛋白A磁珠與特(tè)異(yì)性(xìng)抗體(tǐ)結(jié)合後，能(néng)與樣(yàng)本中(zhōng)的(dí)抗(kàng)原結(jié)合(hé)，通過磁分離富(fù)集抗(kàng)原-抗體-磁珠(zhū)復(fù)合物，從(cóng)而(ér)實現(xiàn)對目標(biāo)抗(kàng)原的(dí)分(fēn)離和檢測。

• 免疫共沉(chén)澱（Co-IP）：用於確定兩種蛋白質在完整細胞內的(dí)生理(lǐ)性相互作用(yòng)。磁珠(zhū)法(fǎ)可保留細胞內(nèi)蛋白(bái)質(zhì)-蛋白質(zhì)相互(hù)作用(yòng)，通(tōng)過抗體捕獲目(mù)標(biāo)蛋(dàn)白(bái)及(jí)其(qí)相互(hù)作(zuò)用夥伴(bàn)。

• 染(rǎn)色質免疫沉澱（ChIP）：用於(yú)研(yán)究(jiū)蛋白質(zhì)與DNA的(dí)相(xiāng)互作(zuò)用。蛋(dàn)白A磁珠可(kě)高(gāo)效(xiào)富(fù)集(jí)與(yǔ)特(tè)定蛋(dàn)白結(jié)合的DNA片(piàn)段。

五(wǔ)，儲存與使用注(zhù)意事項(xiàng)

• 儲(chǔ)存條件(jiàn)：蛋(dàn)白(bái)A磁珠(zhū)通(tōng)常(cháng)需(xū)在(zài)2-8℃下冷藏保存，避(bì)免冷凍和(hé)幹燥。部分產品(pǐn)可(kě)能(néng)含有保(bǎo)護劑(jì)（如疊氮鈉），可(kě)在4℃下保(bǎo)存較長時間(jiān)。

• 使(shǐ)用(yòng)注(zhù)意(yì)事(shì)項：

• 使用前需(xū)用(yòng)結合緩衝液洗滌(dí)磁珠(zhū)，去除保護液。

• 抗體吸附(fù)條件(jiàn)需優化，如(rú)建(jiàn)議(yì)5-25μg抗(kàng)體(tǐ)與磁珠(zhū)室溫孵育(yù)10分鐘，振蕩混匀(yún)。

• 洗(xǐ)脫液常(cháng)用0.1M甘氨(ān)酸（pH3.0），洗脫後需立即中和(hé)以(yǐ)保持抗(kàng)體的生(shēng)物活(huó)性(xìng)。

• 避免(miǎn)長(cháng)時間(jiān)室溫放(fàng)置(zhì)，用完後請(qǐng)及時(shí)放回(huí)4℃冰(bīng)箱。

關於我們:

陝西(xī)星貝(bèi)愛科生物科(kē)技經(jīng)營的產品種(zhǒng)類(lèi)包(bāo)括(kuò)有：合(hé)成磷脂(zhī)，高分(fēn)子聚乙二醇衍(yǎn)生(shēng)物，嵌段共聚(jù)物，磁(cí)性納(nà)米顆粒，納(nà)米金(jīn)及(jí)納米金(jīn)棒(bàng)，近(jìn)紅外(wài)熒(yíng)光(guāng)染(rǎn)料，活(huó)性熒光(guāng)染料，熒(yíng)光(guāng)標(biāo)記物，蛋白交聯(lián)劑，小分子(zǐ)PEG衍(yǎn)生(shēng)物(wù)，點(diǎn)擊(jī)化(huà)學產品，樹枝狀聚合物，環(huán)糊(hū)精(jīng)衍(yǎn)生(shēng)物(wù)，大環(huán)配體類(lèi)，熒(yíng)光量子點(diǎn)，透(tòu)明(míng)質(zhì)酸衍生(shēng)物，石(shí)墨烯或氧化(huà)石墨(mò)烯，碳納米管，富(fù)勒烯，二(èr)氧化(huà)矽(guī)及(jí)介孔二氧(yǎng)化(huà)矽(guī)，聚合(hé)物微(wēi)球，近紅外熒(yíng)光染(rǎn)料，聚苯(běn)乙(yǐ)烯(xī)微球，上轉(zhuǎn)換納(nà)米(mǐ)發光顆(kē)粒，MRI核磁(cí)造影(yǐng)產品(pǐn)，熒光蛋(dàn)白及熒(yíng)光(guāng)探(tàn)針等(děng)等。

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